Archive for Июнь 19th, 2008

Коржевский А.И., Никольский В.О., Бояринов Г.А.
Военно-медицинский институт ФСБ России
г. Нижний Новгород, Россия

Цель работы – изучить влияние озона на микроциркуляторное русло (МЦР) селезенки при искусственном кровообращения (ИК).
Материалы и методы. Опыты проведены на 56 собаках обоего пола 29,7±4,8. 1 серия – 12 животных (интактные - премедикация-промедол, атропин, эфирно-кислородный наркоз, миорелаксанты), 2 серия контрольная - 15 животных (оксигенированное ИК в течение 3 часов), 3 серия опытная - 15 животных (прерывисто озонированное ИК по 15 мин с интервалом в 15 мин в течение 3 часов), 4 серия опытная - 14 животных (постоянно озонированное ИК, в течение 3 часов). Перфузат барбатировали смесью озонированного кислорода с со­держанием озона от 0,048 до 0,105 мг/л.
C целью изучения влияния озона при искусственном кровообращении (ИК) на микроциркуляторное русло (МЦР) селезенки через 3 часа ИК производили лапаротомию и иссекали кусочки печени для морфологического и морфометрического исследования данных объектов. Морфометрия проводилась с помощью микроскопа МИКМЕД-6 с видеокамерой и компьютерной программы Coreldraw10.
Результаты. Через 3 часа эфирно-кислородного наркоза (ЭКН)  центральная артерия, выходящая из мальпигиева тельца, была окружена соединительнотканной влагалищной оболочкой, представленной коллагеновыми волокнами. Влагалищная  оболочка вокруг артериальных сосудов примерно в 2 раза толще чем у венозных. Эндотелий капилляров выявлялся более утолщенным по сравнению  с  эндотелием центральных артерий.
Индекс площади красной пульпы составлял в среднем 72% от общей площади селезенки, белой – в среднем 28%, что соответствует нормальному строению органа. Ширина периваскулярных пространств составляла в среднем 3 мкм, что говорит об отсутствии периваскулярного отека (см. табл.).
Через 3 часа оксигенированного искусственного  кровообращения  (2 серия опытов) в красной пульпе обращало на себя внимание повышенное кровенаполнение  и расширение синусов. В стенках артериол часто определялось плазматическое пропитывание. В мелких венозных  сосудах,  капиллярах  и  синусах определялись стазы, сладжи и микротромбы. Периваскулярные пространства были расширены  до  1/2  диаметра проходящих в них сосудов. Эндотелиальные клетки, выстилающие трабекулярные кровеносные сосуды выявлялись набухшими с округлыми ядрами, по сравнению с уплощенной формой эндотелия при ЭКН. Еще более отечными  выявлялись эндотелиальные  клетки артериол и капиллярной сети фолликулов. Наибольшие изменения определялись в эндотелии синусов.  Увеличивалась  ширина муфтообразно утолщенных стенок артериол фолликулов.  Так если при ЭКН она составляла примерно 1/4 от  диаметра  сосуда,  то  после 180 мин ИК с оксигенацией перфузата - 1/3 - 1/2 .
Индекс площади
красной пульпы составлял в среднем 92% от общей плошади селезенеки, соответственно, белой – в среднем 8%, что свидетельствует о повышенном кровенаполнении  и расширении синусов красной пульпы. Ширина периваскулярных пространств составляла в среднем 6,5 - 7 мкм, что говорит о выраженном периваскулярном отеке (см. табл.).
Через 3 часа прерывисто озонированного ИК в сосудах микроциркуляторного русла уменьшалось  количество стазов, сладжей и микротромбов. Периваскулярные пространства были менее расширены по сравнению с контрольной серией. Менее  выражен был отек эндотелиальных клеток капиллярной сети фолликулов, уменьшалась ширина муфтообразно утолщенных стенок артериол. Уменьшалось мукоидное набухание коллагеновых волокон в  трабекулах, наиболее выражено оно было в фасциальных влагалищах внутритрабекулярных сосудов и стенках артериол. В сосудистых стенках редко выявлялось плазматическое пропитывание. В красной пульпе менее резко было выражено кровенаполнение по сравнению с оксигенированным ИК.
Через 3 часа ИК, с непрерывно озонированным перфузатом (4 серия опытов) в сосудах микроциркуляторного русла редко определялись стазы и сладжи и совсем отсутствовали микротромбы. Периваскулярные пространства были расширены, относительно серии с ЭКН, но были значительно уже, чем в серии с оксигенированным ИК и менее широкие, чем в серии с прерывистым озонированием перфузата. Уменьшался отек эндотелиальных клеток капиллярной сети фолликулов и в эндотелиальных клетках синусов, отсутствовали вакуоли в их цитоплазме, состояние стенок фолликулярных артериол не изменялось по сравнению с прерывисто озонированным ИК. Через 3 часа ИК, с непрерывно озонированным перфузатом, кровенаполнение красной пульпы сохранялось на уровне предыдущей серии, однако оно было более равномерным.
В обеих опытных сериях индекс площади красной пульпы приближался к нормальным значениям ЭКН и достоверно отличался от значений контрольной серии. Высокие значения индекса площади красной пульпы контрольной серии опытов свидетельствуют о повышенном кровенаполнении  и расширении синусов красной пульпы.  Соответственно индекс площади белой пульпы в опытных сериях также приближался к норме. Ширина периваскулярных пространств артериол в обеих опытных сериях приближалась к таковым значениям при ЭКН (достоверно не отличалась). Выраженный периваскулярный отек имел место только в контрольной серии опытов (см. табл.).
Таблица.  Морфометрические показатели МЦР селезенки.


Измеряемый показатель
Значение
ЭКН
(1 серия)
Оксигенированное
ИК

(2 серия)
Прерывисто озонированное ИК
(3 серия)
Постоянно озонированное ИК
(4 серия)
1
Индекс площади красной пульпы, %
0,72±0,05
0,92±0,05(а)
0,80±0,05(б)
0,78±0,06(б)
2
Индекс площади белой пульпы, %
0,28±0,02
0,08±0,03(а)
0,20±0,02(а,б)
0,22±0,04(б)
3
Соотношение красной/белой пульпы
2,57±0,22
11,50±0,12(а)
4,0±0,12(а,б)
3,55±0,26(а,б)
4
Ширина периваскулярных пространств артериол, мкм
3,12±0,23
6,75±0,32(а)
3,56±0,23(б)
3,42±0,16(б)

Примечание: а – достоверно отличается от ЭКН (1 серия),
                       б – достоверно отличается от О2 (2 серия).

Заключение. Итак, результаты морфологического и морфометрического исследований МЦР селезенки через 3 часа озонированного ИК показали защитное действие озона на уровне микроциркуляторного русла, более выраженное в серии с непрерывным озонированием перфузата, проявившиеся в умеренном кровенаполнении синусов, отсутствии сладжей и микротромбов в сосудах МЦР, а также в приближении морфометрических показателей к таковым при ЭКН.
Таким образом, озонирование перфузата, особенно в непрерывном режиме, через 3 часа ИК  предотвращает повреждение микроциркуляторного русла селезенки.
 

Бояринова Л.В.
Военно-медицинский институт ФСБ России,

г. Нижний Новгород, Россия

Лимфатические узлы являются органами лимфоцитопоэза, иммунной защиты и депонирования протекающей лимфы (Афанасьев Ю.И., 1999). Искусственное кровообращение (ИК) отрицательно влияет на все без исключения системы и отдельные органы, в том числе и на органы иммунитета (Бунятян А.А., 2005). Причиной развития повреждений в лимфатических узлах являются нарушения микроциркуляции и, формирующаяся при искусственном кровообращении, смешанная гипоксия. При этом известно, что гутимин способствует более рациональному использованию кислорода в клетке в условиях гипоксии, оптимизирует работу дыхательной цепи и стабилизирует мембраны (Оковитый С.В. и соавт., 2006).

Цель работы: изучить влияние антигипоксанта гутимина, введенного в период озонированного искусственного кровообращения, на структуру лимфатических узлов в постперфузионном периоде (ПП).

Материалы и методы
Опыты проведены на 35 собаках обоего пола, массой 28,2 ± 3,8 кг. 1 серия - 10 животных (интактные - премедикация: промедол, атропин; эндотрахеальный эфирно-кислородный наркоз в течение 3 ч), 2 серия - 11 животных (2 ч ПП после озонированного ИК); 3 серия - 14 животных (2 ч ПП после озонированного ИК с введением гутимина). В период проведения ИК перфузат в оксигенаторе обрабатывали смесью озонированного кислорода с содержанием озона от 0,048 до 0,105 мг/л. Гутимин животным 3 серии вводили по следующей схеме: 50 мг/кг внутривенно за 20 мин до перфузии, 20-30 мг/кг в перфузат до и 35-40 мг через каждые 40 мин перфузии.

У интактных животных через 3 часа эфирно-кислородного наркоза, а в опытных сериях через 2 ч постперфузионного периода производили лапаротомию и иссекали  брыжеечные лимфатические узлы для выполнения морфологического исследования (световая и электронная микроскопия). Для обзорного просмотра производили окрашивание срезов, приготовленных на санном микротоме МС-2, гематоксилин-эозином. Ультратонкие срезы изготовляли на ультратоме фирмы LKB и контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца (Reyholds, 1963). Материал просматривали в электронном микроскопе.

Результаты и обсуждение
Через 2 ч постперфузионного периода после озонированного ИК при световой микроскопии брыжеечных лимфатических узлов в сосудах микроциркуляторного русла определялись сладжи и стазы, микротромбы не выявлялись. Сохранялось плазматическое пропитывание стенок артериол. Межфолликулярные пространства, корковое плато и паракортикальная зоны были заполнены лимфоцитами, отек этих зон лимфоузлов сохранялся. Дистрофические изменения волокнистого компонента стромы лимфоузлов проявлялись в мукоидном набухании коллагеновых волокон в хиларной зоне .
Через 2 ч постперфузионного периода после 3 часов  озонированного ИК с введением гутимина в лимфоузлах увеличивалась митотическая активность клеток светлых центров фолликулов. В среднем количество митозов в светлых центрах фолликулов составляло 5-6, а в некоторых доходило до 9-10, в клеточном составе в них увеличивалось количество лимфобластов и плазматических клеток. Не наблюдался отек межфолликулярных пространств, коркового плато, паракортикальной зоны и мякотных тяжей, не встречались диапедезные кровоизлияния
Исследование ультраструктуры брыжеечных лимфатических узлов показало, что через 2 часа постперфузионного периода после озонированного ИК наблюдалась гидратация протоплазмы и конденсация хроматина в глыбки в ядрах эндотелиальных
клеток, увеличение диаметра цистерн саркоплазматического ретикулума. Базальная и люминальная мембраны были четкие без разрывов с умеренными явлениями отека, более выраженными в базальной мембране. В единичных капиллярах встречались небольшие агрегаты эритроцитов. В лимфоидных клетках четверть митохондрий имели деформированные кристы и сниженной электронной плотности матрикс, выявлялась гидратация протоплазмы и конденсация хроматина в глыбки в ядрах лимфоцитов. Сохранялся увеличенным диаметр цистерн саркоплазматического ретикулума Через 2 часа постперфузионного периода после озонированного ИК на фоне введения гутимина в лимфоидных клетках не определялась гидропическая дистрофия. Наружные мембраны митохондрий были без разрывов, кристы плотно упакованы, матрикс имел умеренную электронную плотность. Цистерны саркоплазматического ретикулума были не расширены. Ядерные мембраны имели ровные контуры, не отмечалось конденсации хроматина в глыбки.

Итак, введение гутимина во время озонированного ИК более полно предупреждает гипоксические изменения в микроциркуляторном русле, паренхиматозном и стромальном компонентах лимфоузлов и их органелл в постперфузионном периоде по сравнению с озонированием перфузата.

Литература
1.      Гистология, цитология и эмбриология /Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. Ю.И. Афанасьева,  Н.А.Юриной. - М.: Медицина, 1999.

2.      Оковитый, С.В. Клиническая фармакология антигипоксантов и антиоксидантов /С.В. Оковитый, С.Н. Шуленин, А.В. Смирнов. - СПб., 2006.

3.      Руководство по кардиоанестезиологии /А.А. Бунятян, Н.А. Трекова, А.В. Мещеряков и др. /Под ред. А.А. Бунятяна, Н.А. Трековой.- М.: ООО Мед. информ. агенство, 2005. - 688 с.

Новая версия "Информационной системы озонотерапевта" на стадии тестирования!

Скачать и установить новую версию можно будет с 1 июля